口蹄疫ワクチンの下流精製プロセスの概要

口蹄疫（FMD）は、口蹄疫ウイルスによって引き起こされる急性、高熱、非常に伝染力の高い感染症で、ほぼすべての偶蹄類動物（豚、牛、羊など）に感染する可能性があります。これは、これまでに発見された動物の病気の中で最も感染力が強く、畜産業に最も大きな被害を与えます。

 

口蹄疫の主な感染経路は、消化管、呼吸器、損傷した皮膚、粘膜と健全な皮膚（乳房の皮膚など）、粘膜（目の結膜）です。空気感染、尿、牛乳、精液、唾液を介しても感染します。わが国における口蹄疫の予防と制御は主にワクチン接種によって行われ、口蹄疫の発生を狩っています。ワクチン接種は口蹄疫の具体的な予防の有効な手段です。

 

ワクチン接種は口蹄疫の確実な予防手段であり、安全で効果的なワクチンは口蹄疫の予防、制御、そして最終的な撲滅を成功させるための前提条件です。弱毒化不活化ワクチンやその他の従来のワクチンは免疫原性が良好で、口蹄疫の予防と制御に重要な役割を果たしています。しかし、世界の一部地域での口蹄疫の発生は、ウイルスの毒性が強い、ウイルスの不完全な不活化、生ウイルスが処理工場から逃げるなどの安全でない要因により、不活化ワクチンに生きたウイルスが残留していることに関連しているようです。より安全で効果的な口蹄疫ワクチンの探求を促しています。分子生物学技術の急速な発展に伴い、サブユニットワクチン、給餌ワクチン、合成ペプチドワクチン、タンパク質キャリアワクチン、遺伝子欠失ワクチン、生キャリアワクチン、核酸ワクチンなどの口蹄疫ウイルス（FMDV）遺伝子工学ワクチンが登場しています。

 

弱毒化・不活化口蹄疫ワクチンの製造工程

 

口蹄疫ウイルスの遺伝子組み換えワクチンの製造技術

 

清澄化濾過

 

深層濾過膜：濾過技術はワクチンなどの生物学的製品の製造プロセスで広く使用されており、その中でも深層濾過技術は病毒の採取プロセスで細胞残骸などの不溶性不純物を分離するためによく使用されます。初期の口蹄疫ウイルスの浄化では、折り畳み膜フィルターエレメントに代表される表面濾過技術が主に採用されていました。培養条件の変化、細胞残骸不純物の増加に伴い、表面濾過では浄化効果が得られにくくなり、表面濾過負荷が低いため、フィルター材料のコストがますます高くなっています。

上記のような背景から、深層濾過は口蹄疫ウイルスの細胞液分離の過程でますます多く応用され、現在最も広く使用されている採取方法の一つとなっている。深層濾過膜は通常、セルロース、多孔質濾過助剤（珪藻土など）、正電荷イオン濾過助剤で構成されており、膜の後に形成されるチャネルは、迷路開口部構造に似た非常に曲がりくねった形状をしていることが多い。不純物粒子は、表面ではなくフィルタ材料の内部に捕捉されることが多く、フィルタチャネルの壁は、静電気作用や分子間力によって、非常に微細な粒子不純物を吸収することが多い。一部の濾過助剤を添加することで、深層濾過は一部の可溶性不純物も除去できるため、後続の精製ステップの圧力を軽減することができる。

 

しかし、培養規模が大きすぎると、多数の深層濾過膜が必要となり、消耗品コストが大幅に増加します。同時に、細胞培養の高密度化により深層濾過膜の負荷が軽減され、コストの増加や製品の過度な希釈につながります。

精密濾過 精密濾過法は、主に接線流濾過装置に使用され、膜の構成要素は平膜カセットと中空糸です。 接線流濾過（TFF）は、膜間の圧力差によって駆動されます。 膜の孔径より小さい物質や不純物は膜を通過しますが、粒子が大きい細胞などの不純物は捕捉されます。 精密濾過に使用される膜の孔径は {{0}}.45/0.22μm です。 中空糸接線流精密濾過は、高密度細胞培養培地などの高固形分液体を直接処理できるため、遠心分離や前濾過の手順が不要になり、手順が少なく、操作が簡単で、膜は洗浄によって繰り返し使用でき、設備投資と運用コストを削減し、モジュール式自動化生産の要件に沿っています。

 

Uろ過（濃度変化）

 

限外濾過は、不活化剤などの一部の低分子量の雑多なタンパク質やプロセス関連の不純物を除去し、回収された液体の量を大幅に減らすことができ、後続のプロセス操作に役立ちます。限外濾過法は、接線流濾過装置の主な用途であり、膜コンポーネントには膜エンベロープと中空糸の2つがあり、通常の状況では、限外濾過システムを適用すると、ウイルス濃度を100倍以上にすることができ、雑多なタンパク質の除去率は最大99％になります。その中でも、中空糸膜コンポーネントは、せん断力が穏やかで低く、詰まりにくく、操作が柔軟で、寿命が長く、コストが低く、拡張しやすいなどの利点があるため、ウイルスの濃縮と精製には中空糸を選択することをお勧めします。

限外濾過法で液体を濃縮する場合、適切な膜の開口部を選択することが非常に重要であり、これは濃縮の効率と製品の品質を直接決定します。一方では、収量を確保するためにターゲット分子を効果的に捕捉できる膜の開口部を選択する必要があり、他方では、異種タンパク質の除去効果と処理速度を十分に考慮する必要があります。したがって、最善の原則は、ターゲット分子を捕捉できる最大の孔径を持つ膜を選択し、均一な孔径分布を持つフィルター膜を選択するように努めることです。

弱毒化/不活化FMDワクチンの場合、FMDVの遮断を完了するために、通常、100-750kd開口限外濾過膜が使用されます。FMD遺伝子組み換えワクチンの場合、通常、対象物質の分子量の3-6倍（好ましくは5倍）の膜開口が選択されます。

 

ガイドリングテクノロジー

杭州桂林科技有限公司は、バイオ医薬品の下流の清澄化、分離、精製に重点を置く生産志向の国家ハイテク企業です。製品は、ワクチン、モノクローナル抗体、診断、血液製品、血清、エンドトキシンなどの生物学的製品のろ過プロセスに広く使用されています。当社は、「平膜カセット」、「中空糸カラム」、「接線流ろ過装置」、「ウイルスフィルター」、「深層膜スタック」、「細菌フィルター」などの製品を持っています。小型の使い捨て実験室ろ過から生産ろ過システムまで、幅広い製品ラインを持ち、テストと生産のニーズを満たしています。桂林科技はあなたとの協力を楽しみにしています！