限外ろ過遠心パイプの専門的な質問への回答

1.限外ろ過チューブの膜材料は何ですか？

ポリエーテルスルホン膜は、明確で正確な分子量遮断、安定した物理的および化学的特性、非常に低いタンパク質吸着、および高い生成物回収率を備えています

2.分子量の異なるタンパク質を分離する必要がある場合、タンパク質の分子量にどの程度の違いが必要ですか？

2つのタンパク質はサイズが10倍以上異なる必要があります

3.限外ろ過遠心チューブはウイルス濃縮に使用できますか？

限外ろ過遠心チューブは、ウイルスを何度も、さらには何度も濃縮する可能性があります。 ウイルス用の特殊な膜があります。 さまざまなウイルスが適切な膜孔径を選択する必要があります

4.限外ろ過遠心チューブは消毒でき、耐アルカリ性がありますか？

75％エタノール水溶液で消毒できます。 私たちの材料は0.1-0.5n水酸化ナトリウムアルカリ洗浄に耐えることができます

5.限外ろ過遠心チューブは高圧滅菌に使用できますか-

高圧滅菌に適した特殊な限外ろ過遠心チューブがあります

6.タンパク質の安定性を考慮して、限外ろ過チューブを低温で遠心分離できますか？

はい、私たちの材料は低温に耐性がありますが、濃縮時間は長くなります。 膜のろ過速度は供給液の温度に関係しています

7.回収率について

一般に、濃度が0 .1mg / mlを超える溶質の回収率は、90％以上です。 一般的に、サンプルの損失は、フィルター膜の表面と材料パイプの表面への非特異的吸着によって引き起こされます。 高い回収率を得るために、選択したフィルター膜の保持分子量はターゲットタンパク質の約1/3であり、限外濾過膜は非対称膜であり、その孔径は正規分布しており、遠心力の高い下で漏れる可能性がありますプレッシャー。 この状態では、タンパク質液が変形する可能性がありますので、遮断口径が小さいほど流量は遅くなりますが、回収率は高くなります。

8.タンパク質が濃縮されると、沈殿が生じます。 どのように対処しますか？

タンパク質の濃縮が速すぎたり多すぎたりすると、タンパク質が沈殿する可能性があります。 タンパク質濃度後の最終濃度は高すぎてはいけません。 濃縮速度に敏感で沈殿しやすいタンパク質の場合、推奨される改善方法は次のとおりです。

1）遠心速度を下げ、

2）高分子量の限外ろ過膜を使用する

3）濃縮管を吹き飛ばして吸引し、遠心分離します

9.限外ろ過遠心分離管が遠心分離できない理由として考えられるものは何ですか？

限外ろ過チューブが遠心分離できない場合は、限外ろ過膜が完全に乾燥した後、膜表面の疎水性が弱く、低表面に浸した後にフラックスを回復できるため、最初の遠心分離は約20％エタノール水溶液で実行できます。張力溶媒

10.限外ろ過チューブの適切な使用と保存

限外ろ過チューブは、その完全性を確認するために、使用前に最初に精製水で遠心分離する必要があります。 使用後は、メンブレンが乾燥しないように湿った状態で保管する必要があります。

11.限外ろ過チューブからエンドトキシンを除去する方法は？

私たちが提供する限外ろ過チューブは、エンドトキシンで処理されていません。 同時に、自然界にはエンドトキシンが広く存在するため、内部毒素を必要とするサンプルは、実験前に0 .5N水酸化ナトリウムで事前に洗浄し、次にRO水で洗浄してエンドトキシンの大部分を除去できます。

12.濃縮タンパク質を下流で分析すると、干渉があることがわかります。 理由は何ですか？

限外ろ過チューブは、バッファーまたは精製水で事前に洗浄できます。 それでも干渉が存在する場合は、0 .1N水酸化ナトリウムで洗浄してから、精製水で洗浄します。

13.濃縮プロセスでは、標的タンパク質と限外濾過膜の間に非特異的な吸着がある可能性があります。 それを改善する方法は？

親水性のポリエーテルスルホン膜を使用していますが、特殊な特性を持つ一部のタンパク質では、膜との非特異的吸着が強化される場合があります。 この場合、実験前に限外ろ過チューブの前処理を試みるか、エンジニアに連絡することができます

14.濃縮後、濃縮物に標的タンパク質がないことがわかります。 考えられる理由は何ですか？

1）タンパク質の初期濃度は低すぎてはいけません。 濃度が低すぎると、メンブレンが保持されない場合があります

2）適切なメンブレンポアサイズを選択します。 限外ろ過チューブの遠心分離と濃縮は行き止まりろ過に属します。 膜の孔径は、一般的に標的タンパク質の2倍未満です。

3）適切な遠心速度を選択します

4）標的タンパク質が沈殿するかどうか