Guidling Technology により、脱塩と濃縮のシンプルかつ効率的な方法を学ぶことができます

タンパク質は分離精製後に脱塩する必要があることが多く、これらの塩は主に生体内の各種イオン(ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩素イオンなど)や抽出液中の緩衝塩、抽出液中の塩などに由来します。溶離液、および実験に使用される特定の変性剤の塩成分。 高濃度の塩は、タンパク質の活性と安定性、および他の分子との相互作用に影響を及ぼし、干渉信号を生成したり、電気泳動、質量分析、結晶学的研究などの後続の分析方法での測定精度を低下させたりする可能性があります。 そのため、分離後の精製タンパク質は脱塩する必要があり、主な脱塩方法としてはメンブレン(透析や限外濾過)やゲル濾過クロマトグラフィーがよく用いられます。 また、場合によっては希釈により脱塩することも可能です。

 

透析脱塩は、サイクルが長く、大量の置換液が必要なため、その用途は大きく制限されており、産業ではあまり使用されていませんが、主に研究室で部分的に使用されており、研究室でも徐々に限外濾過チューブに置き換えられています/限外濾過カップ。

 

タンパク質の脱塩および濃縮のプロセスで使用される主な膜分離技術は限外濾過です。 限外濾過は、高効率、低エネルギー消費、相変化なし、化学試薬の添加不要、操作が簡単、温和な条件、生体高分子の活性をよりよく維持できる能力、高い回収率などの利点を備えた膜分離技術です。 、タンパク質の分離と精製での使用には独特の利点があります。

 

限外濾過は、多孔質膜を分離媒体として使用し、膜の両側の圧力差を駆動力として溶液中の異なる分子量の物質を分離する膜濾過方法であり、脱塩、濃縮に役割を果たします。そして浄化。 近年開発された新しい方法で、生体高分子、特にタンパク質や酵素の濃縮・脱塩に最適です。 限外濾過の応用の鍵は膜の選択です。膜の種類や仕様が異なると、水の流量、分子量カットオフ、その他のパラメータが異なります。関連する作業のニーズに応じて選択する必要があります。 また、限外濾過装置の形状、溶質の組成や性状、溶液濃度等も限外濾過の効果に一定の影響を与えます。

 

タンパク質の精製工程におけるタンパク質の脱塩・濃縮に限外濾過技術を応用することにより、数百リットルから数千リットルの大量液体の処理に適しており、操作が簡単で時間の節約ができるという利点があります。 、タンパク質回収率が高い。 限外濾過法は、研究室の微量処理用の限外濾過チューブ、少量処理用の限外濾過カップ、および工業用の限外濾過システムから成熟しました。

 

限外濾過は直圧限外濾過と接線流濾過に分類され、現在、産業界では主に接線流濾過が使用されており、脱塩や緩衝液置換に広く使用されています。

 

以下は、タンパク質の脱塩と濃縮における Guidling Technology の限外濾過膜カセットの応用例です。

 

{{0}}.11㎡ 10 kd 孔径膜カセット (G01100010K) を使用して、500 mL の PEG 修飾成長ホルモン溶液を脱塩し、濃度 0.2 mg/mL に濃縮しました。 限外濾過プロセス全体を通じて、脱塩率、タンパク質回収率、膜フラックス破損状態、および水フラックス回収率を検査しました。

 

使用前後に膜カセットの水流束を別々に試験したところ、同じ供給速度、供給圧力、還流圧力を維持する前提で膜カセットの回収率は98%に達しました。

 

全プロセスで合計 2L の材料を処理し、40分かかりました。濃縮プロセスは 0-5分、液体交換プロセスは 5-35分、そして 35-40 分でしたそれは過集中のプロセスでした。 限外濾過プロセス全体を通じて、TMP は 0.{7}}.8 bar の間で安定し、供給速度は一定で、平均物質流束は 27 LMH でした。

 

原料濃縮液2Lを60mLに交換、約33倍濃縮、脱塩率99%、回収率80%に達し、洗浄後、液量50mL増加、総回収率88%、工業生産によるパイプライン計算のデッドボリュームを可能な限り上洗回数を増やすことで、一般的な上洗3回で完全に回収できます。

 

Guidling Technology 膜カセットは、強い耐食性を備えた医療グレードの不活性材料で作られており、強いアルカリ洗浄に耐えることができます。 自動化された製造プロセスの使用により、製品の連続性と品質の信頼性、より高い機械的強度、背圧耐性、および繰り返しのすすぎ性能が保証されます。 超親水性を備えているため、膜の流束が向上し、タンパク質の吸着が低下します。 また、圧力損失が小さく、材料の移送が容易になり、濾過時間が大幅に短縮される最適化された流路設計も行っています。

 

当社のメンブレンカセットは、1kd から 1000kd までの幅広い細孔サイズでご利用いただけます。 そのうち、1-10kd 限外濾過膜カセットは、脱塩と発熱物質の除去に使用できます。 30kd 限外濾過膜カセットは、モノクローナル抗体の濃縮とバッファー交換に使用できます。 同時に、当社の中空糸製品は、100kd、300kd、および500kdの細孔サイズを備え、生物学的製剤の濃縮および置換にも使用でき、主にワクチン製品の多くの用途に使用されます。

 

Guidling Technology は、バイオ医薬品、細胞培養、生物医学の精製と濃縮、診断および工業用流体に重点を置いている国家ハイテク企業です。 当社は、バイオ医薬品、細胞培養などのアプリケーションシナリオに完全に適合する遠心濾過装置、限外濾過および精密濾過カセット、ウイルスフィルター、TFFシステム、デプスフィルター、中空糸などの開発に成功してきました。 当社のメンブレンおよびメンブレンフィルターは、前濾過、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過などの濃縮、抽出、分離に広く使用されています。 小型の使い捨て実験室用ろ過から生産用ろ過システム、無菌試験、発酵、細胞培養などに至るまで、当社の多くの製品ラインは、試験と生産のニーズを満たします。 Guidling Technology はあなたとの協力を楽しみにしています!

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